四川农业大学学报 ›› 2013, Vol. 31 ›› Issue (04): 377-380.doi: 10.3969/j.issn.1000-2650.2013.04.003
根癌农杆菌介导的芥菜型油菜高效遗传转化
巩健1, 张源2,3, 杜立国3
- 1. 淄博职业学院制药与生物工程系, 山东 淄博 255000;
2. 青海师范大学生命与地理科学学院, 西宁 810008;
3. 中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心, 石家庄 050021
Efficient Agrobacterium-mediated Transformation Protocol of Brassica juncea
GONG Jian1, ZHANG Yuan2,3, DU Li-guo3
- 1. Pharmaceutical and Bioengineering Department, Zibo Vocational Institute, Zibo 255000, Shandong, China;
2. College of Life Science and Geography, Qinghai Normal University, Xining 810008, China;
3. Center for Agricultural Resources Research, Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Shijiazhuang 050021, China
摘要： [目的] 建立芥菜型油菜(Brassica juncea)高效遗传转化体系。[方法] 以芥菜型油菜带柄子叶为材料,采用农杆菌介导的转化方法,将外源基因导入芥菜型油菜愈伤组织,并获得再生植株。[结果] 外植体在侵染前,预先在含2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+6mg/L AgNO3的MS培养基上进行预培养2~3d。侵染6~8min后转入共培养培养基中2~3d,之后转到含10mg/L卡那霉素的MS筛选培养基上进行筛选培养2~3周。对成活植株进行GUS染色和PCR验证,证明外源基因已经成功转入芥菜型油菜的基因组中。[结论] 通过优化愈伤组织诱导条件和农杆菌侵染时间,可显著提高芥菜型油菜的遗传转化效率。
中图分类号:
- S565.4
