四川农业大学学报 ›› 2007, Vol. 25 ›› Issue (03): 337-342.doi: 10.16036/j.issn.1000-2650.2007.03.014
重组鸭α-干扰素基因工程菌表达条件的研究
杨梅1, 程安春1,2, 汪铭书1,2, 张瑶2, 龚永强1, 陈斌1,3
- 1. 四川农业大学 动物科技学, 四川 雅安 625014;
2. 动物疫病与人类健康四川省重点实验室, 四川 雅安 625014;
3. 四川省兽医防疫总站, 成都 610041
Studies on the Expression Conditions of Engineering E. coli Expressing Recombinant Duck Interferon-α
YANG Mei1, CHENG An-chuan1,2, WANG Ming-shu1,2, ZHANG Yao2, GONG Yong-qiang1, CHEN Bin1,3
- 1. College of Animal Science and Technology, Sichuan Agricultural University, Yaan 625014, Sichuan, China;
2. Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province, Yaan 625014, Sichuan, China;
3. Sichuan Provincial Animal Epidemic Prevention, Supervision General Office, Chengdu 610041, China
摘要： 为了确定重组鸭α-干扰素(DuIFN-α)基因工程菌BL2(DE3)/pET32a+-DuIFN-α的最佳表达条件,对影响原核表达的主要因素:IPTG浓度、诱导时期、收获时间、培养诱导温度、葡萄糖浓度及培养基进行了优化;并利用抗性筛选对表达质粒的稳定性进行了研究。结果显示,诱导基因工程菌BL2(DE3)/pET32a+-DuIFN-α表达DuIFN-α的最佳条件为:以TB+5 g/L葡萄糖培养基37℃培养至菌体OD600=0.8~1.1时,加入IPTG至终浓度0.2 mmol/L,30℃诱导培养4~5 h。在最佳表达条件下,DuIFN-α的相对含量为34.1%,总含量(终菌体浓度×相对含量)达79.9;各种优化条件对表达质粒的稳定性未见明显影响。
中图分类号:
- S834
